Nagyérzékenységű jelölésmentes optikai bioszenzor kis molekulák kinetikai kölcsönhatásainak feltérképezésére
A rácscsatolt interferometria (angolul Grating-Coupled Interferometry (GCI)) olyan nagyérzékenységű, jelölésmentes optikai bioszenzor technika, mely kiválóan alkalmas különböző molekulák, köztük kismolekulák kölcsönhatásainak kinetikai analízisére. A műszer nagyfokú érzékenységét mindaz bizonyítja, hogy már 100 Da tömegű molekulák, illetve ionok kapcsolódásainak valós idejű követését is lehetővé teszi. További előnye, hogy négycsatornás rendszerének köszönhetően referencia- és párhuzamos mérés is lebonyolítható egyidejűleg. A felületen immobilizált molekulák és a ligandumok közötti kölcsönhatás valós időben nyomon követhető a műszer segítségével.
Munkám során a fenti technika segítségével fehérjék és kismolekulák kapcsolódásait tanulmányoztam. Mérési elrendezéseimben a vizsgált fehérjéket kovalensen rögzítettem a GCI szenzor polimer felületére, optimalizáltam a kikötési protokollt, kimértem a fehérje-ligandum kölcsönhatásra jellemző kinetikai paramétereket (asszociációs és disszociációs kinetikai ráták, egyensúlyi disszociációs állandó) és kísérletesen is összehasonlítottam jól ismert modell rendszerek értékeivel. Továbbá, demonstráltam a GCI módszer alkalmazhatóságát glikofehérjéket hasító enzimek vizsgálatára is. Az egyes cukorrészek enzimatikus hasítását sikerült valós időben kimutatnom.
szerző
-
Borbély Krisztina
Egészségügyi mérnök szak, mesterképzés
mesterképzés (MA/MSc)
konzulensek
-
Dr. Horváth Róbert
tudományos főmunkatárs, laborvezető, ELKH EK MFA Nanobioszenzorika Laboratórium (külső) -
Dr. Bonyár Attila
Egyetemi docens, Elektronikai Technológia Tanszék -
Dr. Kovács Boglárka
tudományos munkatárs, EK MFA (külső)
