Fluoreszcens vegyülettár tervezése és szintézise önjelölő fehérjék vizsgálatához
Kutatómunkám során fluoreszcens jelzővegyületekkel ellátott önjelölő fehérje szubsztrátokat állítottam elő, mellyel a továbbiakban a beépítés hatékonyságának összehasonlítása és többszínű fehérjejelölések megvalósítása a cél. A hat kiválasztott fluoreszcens molekula közül mindegyik szintézise sikeres volt, és ezen molekulákat sikeresen kapcsoltam különböző önjelölő fehérje (Halo-, SNAP-, CLIP-tag) szubsztrátokhoz. A célul kitűzött 17 molekula közül (egy már rendelkezésre állt) eddig 13 molekulát sikeresen előállítottam, a maradék 4 molekulának a szintézise folyamatban van.
A kutatócsoportban az általam előállított jelzővegyületeket különböző sejtvonalakon, módosított fúziós fehérjéken és több különböző festékkombinációval vizsgáltuk. Bár a kísérletek még folyamatban vannak, néhány fontos tapasztalatot már most le tudtunk vonni. Minden önjelölő fehérje szubsztrát esetében volt olyan festék, amellyel hatékony jelölést tudtunk megvalósítani. Emellett tapasztaltunk eltérést a különböző festékkel módosított szubsztrátok beépítési hatékonyságában (a jelölés intenzitásában és a háttér okozta jel/zaj arányban is), és ugyanazon jelzővegyület másként viselkedett az önjelölő fehérjével módosított fehérjétől függően is. Végül a legjobbnak ítélt jelzővegyület-kombinációkkal hatékony két-, illetve háromszínű jelölést sikerült megvalósítani.
szerző
-
Unyi Zsombor
Biomérnöki alapképzési szak, nappali BSC
alapképzés (BA/BSc)
konzulensek
-
Cserép Gergely
tudományos munkatárs, MTA-TTK Szerves Kémiai Intézet (külső) -
Dr. Kele Péter
tudományos főmunkatárs, MTA-TTK (külső) -
Dr. Németh Krisztina
Tudományos főmunkatárs, Természettudományi Kutatóközpont (külső)